荧光抗体技术 编辑

用荧光物标记抗体来检测细胞或组织中相应抗原或抗体的技术
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荧光抗体技术,用荧光物标记抗体来检测细胞组织中相应抗原或抗体的技术。荧光物种类一般有异氰酸荧光素、罗丹明荧光素、二氯三嗪基氨基荧光素。一般是将待测标本固定于玻片表面,滴加已知荧光抗体后再以缓冲液冲洗,干燥后于荧光显微镜下观察阳性是可见带荧光的抗原抗体复合物; 阴性无荧光(因为带荧光的抗体不能与抗原结合,被冲冼掉)。该技术具有简单、特异性高、敏感性低、同时检测种抗原时较复杂等特点。荧光抗体技术是以荧光物标记抗体进行抗原定位的技术。本技术较其他鉴定细菌血清学方法有速度快、操作简单、敏感性高等特点,它在临床检验上已用作细菌、病毒和寄生虫的检验及自身免疫病的诊断等。

基本信息

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中文名:荧光抗体技术

性质:技术

特征:鉴定细菌的血清学方法

优点:速度快、操作简单

技术特点

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本法较其他鉴定细菌的血清学方法速度快、操作简单、敏感性高,但在细菌实验诊断中,一般只能作为一种补充手段使用,而不能代替常规诊断。荧光抗体染色法膜炎奈氏菌、痢疾志贺菌、霍乱弧菌、布氏杆菌炭疽杆菌等的实验诊断有较好效果。

应用

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荧光抗体技术在临床检验上已用作细菌、病毒和寄生虫的检验及自身免疫病的诊断等。在细菌学检验中主要用于菌种的鉴定。标本材料可以是培养物、感染组织、病人分泌排泄物等。荧光间接染色法测定血清中的抗体,可用于流行病学调查和临床回顾诊断。免疫荧光用于螺旋体抗体的检测是梅毒特异性诊断常用方法之一。免疫荧光技术在病毒学检验中有重要意义,因为普通光学显微镜看不到病毒,用荧光抗体染色法可检出病毒及其繁殖情况。

寄生虫感染诊断中,间接荧光抗体染色法有非常广泛的应用。间接免疫荧光试验(ifat)是当前公认的最有效的检测疟疾抗体的方法。常用抗原为疟疾患者血液中红内期裂殖体抗原。ifat对肠外阿米巴、尤其是阿米巴脓肿也有很高的诊断价值,所用抗原是阿米巴培养物悬液或提取的可溶性抗原。

免疫荧光法还是检测自身抗体的好工具,在自身免疫病的实验诊断中应用广泛。其突出优点是能以简单方法同时检测抗体和与抗体起特异反应的组织成分,并能在同一组织中同时检查抗不同组织成分的抗体。主要有抗核抗体、抗平滑肌抗体和抗线粒体抗体等。抗核抗体的检测最常采用鼠肝作核抗原,可做成冰冻切片、印片匀浆。用组织培养细胞如hep-2细胞或hela细胞涂片还可检出抗着丝点抗体、抗中性粒细胞浆抗体等。应用免疫荧光技术可以检出的其他自身抗体有抗(壁细胞抗体、抗双链DNA抗体、抗甲状腺球蛋白抗体、抗甲状腺微粒体抗体、抗骨髓肌抗体及抗上腺抗体等。

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