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放射自显影术 编辑
通过检测放射性标记物质在细胞内的定位来观察某一特定生化反应过程的技术
免疫放射自显影术(autoradiography):通过检测放射性标记物质在细胞内的定位来观察某一特定生化反应过程的技术。首先,将放射性同位素或放射性同位素的标记物注入动物体内或加入培养基中,间隔一定时间取材,制成标本(如切片),在暗室中于标本的上面涂以液体原子核乳胶,置暗处曝光,数日后再经显影和定影处理,或经染色后光镜观察,在放射性同位素或其标记物存在的部位,溴化银被还原成黑色的微细银颗粒,也可在电镜下观察则称之为电镜放射自显影术(eleCTron microscope autoradiography)由此,可获知被检物质在机体、组织与细胞内的分布、数量及代谢径路。在生物学研究中,常用的放射性同位素主要是能量低、射程短、电离作用强β的射线如3H,14C,32P,35S,125I,45Ca,等或其它化合物。例如将125I注入体内可观察碘在甲状腺内的碘化部位及过程;又如把3H标记的胸腺嘧啶苷
中文名:放射自显影术
外文名:autoradiography
方法:详见正文
含义:检测放射性标记物质的技术
免疫放射自显影
放射自显影的原理是利用放射性同位素所发射出来的带电离子(α或β粒子)作用于感光材料的卤化银晶体,从而产生潜影,这种潜影可用显影液显示,成为可见的"像",因此,它是利用卤化银乳胶显像检查和测量放射性的一种方法。
放射性核素的原子不断衰变,当衰变掉一半时所需要的时间称为半衰期。各种放射性核素的半衰期长短不同(表),在自显影实验中多选用半衰期较长者。对于半衰期较短的核素,应选用较快的样品制备方法,所用剂量也应加大。
与染色技术联合使用
用放射自显影能够研究的任何细胞特征或抗原物质定位也可以用放射自显影和免疫染色联合进行研究。特别之处是同时进行抗原定位研究,操作过程直截了当。细胞用适当的方法进行放射性标记,接着进行固定和按所选用的免疫染色法进行染色(注意:此时样品和洗涤后的溶液应该作为放射性物品处理)。然后对细胞样品进行放射自显影,可以同时进行显影银粒和免疫染色观察。