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噬菌斑 编辑
中文名:噬菌斑
外文名:plaque
别名:负菌落
产生:噬菌体侵染细菌细胞
分类:混浊噬菌斑、透明噬菌斑
将适量的噬菌体和敏感细菌在软琼脂中混合,然后平埔于琼脂培养基上,凝固后保温放置,在培养基平面上的细菌,由于噬菌体的作用被溶菌而形成圆形斑,称为噬菌斑。噬菌斑的大小,从肉眼勉强可见的小形斑直到直径1厘米以上的大形斑不等。一般溶原性噬菌体的噬菌斑中央残存着已溶原化的细胞,故成为混浊噬菌斑。相反,烈性噬菌体则形成透明噬菌斑。另还有透明与混浊部分相混杂的斑驳噬菌斑。在适当条件下,一个噬菌体粒子形成一个噬菌斑。对动物病毒一般是把它少量地接种培养于玻璃试管或器皿的单层培养细胞上。当在它上面铺上一层含有中性红染料的琼脂时,由于被病毒感染而变性的细胞不能摄取染料,在一定时间(天数)后便出现噬菌斑。
噬菌斑是噬菌体感染敏感宿主细菌以后在含受体菌的涂布平板上形成的肉眼可见的透明圈。
在涂布有敏感宿主细胞的固体培养基表面,若接种上相应噬菌体的稀释液,其中每一噬菌体粒子 由于 先侵染和裂解一个细胞,然后以此为中心,再反复侵染和裂解周围大量的细胞,结果就会在菌苔上形成一个具有一定形状、大小、边缘和透明度的噬菌斑。
噬菌斑的形成可用于检出、分离、纯化噬菌体和进行噬菌体计数。如,
设0.10mL稀释度为10-6的病毒悬液可产生75个噬菌斑,则样品的噬菌斑形成单位为:
PFU/mL=(75 PFU /0.10 mL )×(106)=7.5× 108