溶血性链球菌编辑

链球菌科链球菌属乙型溶血性链球菌

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链球菌常根据其在血琼脂培养基上溶血环的大小，分为甲、乙、丙三型。其中乙型溶血性链球菌具有完全的溶血性，菌落周围形成一个2-4mm宽、界限分明、完全透明的无色溶血环，这类细菌称为溶血性链球菌。溶血性链球菌（Streptococcus hemolyticus）在自然界中分布较广，是一种常见的病原微生物，呈球形或椭圆形，直径0.6-1.0μm，呈链状排列，长短不一，从4-8个至20-30个菌细胞组成不等，链的长短与细菌的种类及生长环境有关。该菌不形成芽孢，无鞭毛，易被普通的碱性染料着色，革兰氏阳性，需氧或兼性厌氧菌，营养要求较高。溶血性链球菌广泛存在于水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口腔、鼻腔、咽喉中，可通过直接接触、空气飞沫或皮肤、黏膜伤口感染传播，而被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会使人类感染，上呼吸道感染患者、人畜化脓性感染部位常成为食品污染的污染源。溶血性链球菌，可引起皮肤和皮下组

①α型（甲型）溶血性链球菌（α-hemolytic steptococcu）:可引起不完全溶血现象，称甲型或α溶血。其菌落周围可形成1-2mm宽的草绿色溶血环，故这类细菌亦称草绿色链球菌（Srptococcus viriDAns）,多为条件致病菌。其中产生的溶血环为草绿色，是因为细菌产生的H₂O₂等氧化性的物质将血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，绿色其实是高铁血红蛋白的颜色。

②β型（乙型）溶血性链球菌（β-hemolytic sreptococcs）可引起完全溶血现象，称乙型溶血或β溶血。其菌落周围形成-个2-4mm宽的透明溶血环，故这类细菌亦称溶血性链球菌（Srpococcus hemolyticus）,致病力强，可引起人类和动物的多种疾病。

③γ-溶血链球菌（γ-streptococcus）：不产生溶血素，菌落周围无溶血环，也称为丙型或不溶血性链球菌（Streptococcus NOn-hemolytics），该菌无致病性，常存在于乳类和粪便中，偶尔也引起感染。

1933年Lancefild根据链球菌细胞壁多糖抗原的不同，将其分为A、B、C、D四个群，其后不断发现和调整，目前分A-H、K-V共20群。其中，A.B、C群多为乙型溶血性链球菌，D群则为甲型溶血性链球菌或非溶血性链球菌。对人致病的，90%左右属A群, B、C、D、G群偶见，而其他各群的乙型溶血性链球菌主要引起家畜的感染。链球菌的群别与溶血性间无平行关系，但对人类致病的A群链球菌多数呈乙型溶血。 97%的A群链球菌可被杆菌肽抑制，其他链球菌则不被抑制。

分布

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溶血性链球菌

溶血性链球菌在自然界中分布较广，存在于水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口腔、鼻腔、咽喉中，可通过直接接触、空气飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染，被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会对人类进行感染。上呼吸道感染患者、人畜化脓性感染部位常成为食品污染的污染源。

一般来说，溶血性链球菌常通过以下途径污染食品：

1、食品加工或销售人员口腔、鼻腔、手、面部有化脓性炎症时造成食品的污染；

2、食品在加工前就已带菌、奶牛患化脓性乳腺炎或畜禽局部化脓时，其奶和肉尸某些部位污染；

3、熟食制品因包装不善而使食品受到污染。

形态染色

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溶血性链球菌

本菌为圆形或卵圆形,直径为0.5-1μm,常排成链状,链的长短不一,短者由4-5个菌体组成,长者可达20-30个甚至上百个。链的长短与细菌种类和生长环境有关。在液体培养基中易呈长链，固体培养基中常呈短链，由于链球菌能产生脱链酶，所以正常情况下链球菌的链不能无限制的延长。多数菌株在血清肉汤中培养2-4h易形成透明质酸的荚膜，继续培养后消失。该菌不形成芽胞，无鞭毛，易被普通的碱性染料着色，革兰氏阳性，老龄培养或被中性粒细胞吞噬后，转为革兰氏阴性。

大多数链球菌无鞭毛,不能运动,但D群和X群中某些菌株具有鞭毛。不能形成芽孢。多数链球菌在血清肉汤幼龄培养物（2-2.5h）中,易发现荚膜,当培养时间延长,荚膜即逐渐消失。

链球菌用普通苯胺染料易于着染,自病灶分离的链球菌为革兰阳性,但若长时间培养,或被吞噬细胞吞噬后,革兰染色常为阴性。

培养特征

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溶血性链球菌

需氧或兼性厌氧菌，营养要求较高，普通培养基上生长不良，需补充血清、血液、腹水，大多数菌株需核黄素、维生素B6、烟酸等生长因子。最适生长温度为37℃，在20-42℃能生长，最适pH为7.4-7.6。在血清肉汤中易成长链，管底呈絮状或颗粒状沉淀生长。在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐、直径0.5-0.75mm的细小菌落，不同菌株溶血不一。

生化反应

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分解葡萄糖，产酸不产气，对乳糖、甘露醇、水杨苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七叶苷的分解能力因不同菌株而异。一般不分解菊糖，不被胆汁溶解，触酶阴性。

抗原结构

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链球菌的抗原构造较复杂，主要有三种：

（1）核蛋白抗原或称P抗原，无特异性，各种链球菌均相同。

（2）多糖抗原或称C抗原，系群特异性抗原，是细胞壁的多糖组分，可用稀盐酸等提取。

（3）蛋白质抗原或称表面抗原，具有型特异性，位于C抗原外层，其中可分为M、T、R、S四种不同性质的抗原成分，与致病性有关的是M抗原。

致病性

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溶血性链球菌常可引起皮肤、皮下组织的化脓性炎症，呼吸道感染、流行性咽炎的暴发性流行以及新生儿败血症、细菌性心内膜炎、猩红热、风湿热、肾小球肾炎等变态反应。链球菌食物中毒潜伏期较短（5-12h），临床症状较轻，表现为恶心、呕吐、腹痛、腹泻，1-2d即可恢复。溶血性链球菌的致病性与其产生的毒素及其侵袭性酶有关，主要有以下几种。

1、链球菌溶血素：溶血素有O和S两种，O为含有-SH的蛋白质，具有抗原性，S为小分子多肽，分子量较小，故无抗原性。

2、致热外毒素：曾称红疹毒素或猩红热毒素，是人类猩红热的主要毒性物质，会引起局部或全身红疹、发热、疼痛、恶心、呕吐、周身不适。

3、透明质酸酶：又称扩散因子，能分解细胞间质的透明质酸，故能增加细菌的侵袭力，使病菌易在组织中扩散。

4、链激酶：又称链球菌纤维蛋白溶酶，能使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶，具有增强细菌在组织中的扩散作用，该酶耐热，100℃50分钟仍可保持活性。

5、链道酶：又称链球菌DNA酶，能使脓液稀薄，促进病菌扩散。

6、杀白细胞素：能使白细胞失去动力，变成球形，最后膨胀破裂。

抵抗力

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该菌抵抗力一般不强，60℃ 30min即被杀死，对常用消毒剂敏感，在干燥尘埃中生存数月。乙型链球菌对青霉素、红霉素、氯霉素、四环素、磺胺均敏感。青霉素是链球菌感染的首选药物，很少有耐药性。

检验方法

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1、样品处理：取25g固体（或25mL液体）检样加入225mL灭菌生理盐水，制成混悬液。

溶血性链球菌

2、吸取5mL混悬液接种至50mL葡萄糖肉浸液肉汤，或直接划线于血平板（如检样污染严重，可同时接种5mL至匹克氏肉汤），36℃培养24h，接种血平板，36℃培养24h,挑起乙型溶血圆形突起的细小菌落，在血平板上分纯，观察在液体和固体中的培养特征、溶血情况及革兰氏染色、形态，并进行链激酶试验和杆菌肽敏感试验。

3、链激酶试验：吸取草酸钾血浆0.2mL，加0.8mL灭菌生理盐水，混匀，再加入链球菌18-24h 36℃肉浸液肉汤培养物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL，混匀，置于36℃水浴10min，血浆混合物自行凝固，观察凝块重新完全溶解的时间，完全溶解为阳性，如24h后不溶解即为阴性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。

4、杆菌肽敏感试验：取典型菌落的菌液涂布于血平板上，用灭菌镊子夹取每片含有0.04单位的杆菌肽纸片置于上述平板上，36℃培养18-24h，如有抑菌圈出现即为阳性。用已知的阳性菌株做对照。