中文名：肝

外文名：liver

主要功能：去氧化，储存肝糖

形状：呈楔形

重量：一般重约1200～1600g

人的肝脏大部分位于右季肋部及上腹部，小部分位于左季肋区，上界在右锁骨中线平第5肋，上部紧贴膈肌，与右肺和心脏相邻；下面与胃、十二指肠，结肠右曲相邻；后面接触右肾、肾上腺和食管贲门部，是人体最大腺体，红褐色，质软而脆，呈楔形，右端圆钝，左端扁薄，可分为上、下两面，前后两缘，左右两叶，一般重约1200～1600g，约占成人体重的1/50，男性的比女性的略重，成年人肝脏男性有1.4-1.8公斤，女性有1.2-1.4公斤。胎儿和新生儿的肝脏相对较大，可达体重的1/20。正常肝脏外观呈红褐色，质软而脆。肝脏形态呈一不规则楔形，右侧钝厚而左侧偏窄，一般左右径(长)约25cm，上下径(宽)约15cm，前后径(厚)约6cm 。上面突起浑圆，与膈肌接触，下面较扁平，与胃、十二指肠、胆囊和结肠相邻。肝上界与膈肌的位置一致，约在右侧第五肋间，肝脏有一定的活动度，可随体位的改变和呼吸而上下移动；肝下界一般不超过肋弓，正常情况下在肋缘下摸不到，有时在剑突下可触及，但一般不超过3cm，而小儿多可在肋缘下触及。

（图册“肝的解剖结构”： ）

肝的解剖结构

肝脏的显微结构：

肝脏的显微结构

为了制备可植入体内的组织工程肝，并达到实现肝的全部功能、永久性替代重症肝病患者肝脏的最终目的，科学家们在肝组织工程领域做了大量研究。现肝组织工程的研究主要是集中在种子细胞，细胞外基质材料（即三维支架材料）及肝组织结构与生长发育微环境的构建这几方面。

关于肝组织结构的构建研究方面，Auth等将人的胆管上皮细胞等在细胞外基质材料上培养形成类胆管样的结构；Kim等采用内皮细胞和肝细胞共培养，能更佳地维持肝细胞功能；Sakai等通过预培养的成纤维细胞作为饲养层的方法，快速制备出具有有限增殖潜能的可用于具有高度特异性细胞移植的肝细胞片层组织。而我们的HE染色结果显示，在本实验三维支架培养的条件下，可以引导15d小鼠胚胎肝细胞形成血管样结构和肝组织样结构，这与体外培养瓶内平面培养的结果不同，胚胎肝细胞平面培养多见集落样生长，亦无血管样结构形成。

在肝组织工程领域中，种子细胞来源的选择甚为重要。Zavana制备的透明质酸支架材料内，在成纤维细胞分泌的细胞外基质的作用下，体外培养的成熟肝细胞可见细胞-细胞连络的重建，肝细胞分泌ALB的功能维持了14d。而我们免疫组化ALB的表达结果提示，在三维支架培养的条件下，胚胎肝细胞具有分泌ALB的功能，随着体外培养时间的推移，一直到第28d，这些细胞表达ALB的水平增加。PAS显色阳性结果亦提示体外培养第28d细胞质内存在肝糖原的表达。ALB是肝细胞的特异性标记物，也是肝功能表达的重要指标；肝糖原的合成与储存也是体现肝功能的指标之一，以上指标都充分体现出第15d小鼠胚胎肝细胞作为种子细胞的可行性与优越性。又由于胚胎肝细胞所具有的较高增殖能力和分化潜能以及较低的免疫原性，用于对改善肝功能、修复肝损伤应具有重大临床应用价值，不失为理想的种子细胞来源。本实验体外培养1周及4周的支架切片上AFP均呈阳性表达，由于AFP仅在胎肝细胞及成体肝干细胞中表达，而在成熟肝细胞中呈阴性反应，提示在三维支架条件下培养4周的类肝组织内的细胞多数仍具有干细胞特性，如何添加特定细胞因子诱导胚胎肝细胞在三维支架培养条件下向成熟肝细胞或胆管上皮细胞分化，这是胚胎肝细胞作为肝组织工程种子细胞待解决的一个问题。

肝组织工程构建过程中，支架材料与工艺也是关键点之一。在三维支架工艺方面，德国EnvisionTechNOloty公司和美国Clemson大学等研制了能喷射细胞和基质材料的CELLPrinting和CellPlotter。美国Valerie成功制备了肝组织的三维结构的平台，并使用细胞的水凝胶作为支架材料进行肝组织的组装，收到了较好的效果。我们采用的清华大学激光快速成形中心研制的生物材料快速成形机和控制软件组成的“三维受控组装系统”，选择最佳的材料分布和微观结构分布，采用计算机辅助设计软件对肝小叶结构进行模型设计，采用快速成形工艺，利用单喷头复合数字喷射技术对15d胚胎肝细胞材料复合物进行精密喷射成形，制备出管径100μm的类肝组织前体。结果显示实验使用的明胶与纤维蛋白原加入凝血酶交联构成的基质材料具有生物相容性、免疫抗原性小、无毒性等生物医学特征。将其与胚胎肝细胞制备成的细胞三维生长支架，可维持类肝组织内细胞的新陈代谢和生长表型，为进一步探索组装肝组织工程的最佳材料与工艺提供实验数据。