醋酸杆菌 编辑

参与醋酸发酵的微生物
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醋酸杆菌是一类能使类和酒精化成醋酸产物的短杆菌细胞椭圆或短杆,0.8-1.2μm× 1.5-2.5μm,单生、成对偶尔成短链;细胞端尖或平。革兰阳性运动,亚极生的单鞭毛或两根鞭毛。不产芽孢。极端严格好氧,化能无机营养,氧化、还原CO2生成乙酸。也可营化能有机营养,发酵果糖和其他底物几乎只产生乙酸。乙酸是代谢的有机终产物。不产生接触。最适生长温度30℃。广泛分布于生环境中。 模式种:伍氏醋酸杆菌(Acetobacterium woodii)。醋酸杆菌常存在于醋和醋的食品中。工业上可以利用醋酸杆菌酿醋、制做醋酸和葡萄糖酸等。

基本信息

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中文名:醋酸杆菌

拉丁学名:AcetobaCTeriumBalch

界:细菌

门:变形菌门

纲:α-变形杆菌

目:红螺菌目

科:醋酸杆菌科

属:醋酸杆菌属

革兰氏染色革兰阴性菌

形态特征

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冰醋酸冰醋酸

好氧性的醋酸发酵是制醋工业的基础。制醋原料或酒精接种醋酸细菌后,即可发酵生成醋酸发酵液供食用,醋酸发酵液还可以经提纯制成一种重要的化工原料—冰醋酸。厌氧性的醋酸发酵是我国用于酿造糖醋的主要途径。

醋是由醋酸杆菌发酵产生的。醋酸的酸味很强烈,家庭用的食醋中只含有3~6%的醋酸。在发酵过程中,细菌还能产生一些诸如乙酸乙酯一类的产物,使醋有好闻的香气。

利用醋酸杆菌对水果进行发酵还能制造出易贮藏,又好吃的甜食果脯。

醋酸杆菌还能将山梨中的山梨醇转化成山梨糖,这在自然界中少有,却是合成VC的主要原料。

另外,醋酸杆菌还可以用于生产淀粉酶果胶酶。

主要危害

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醋酸杆菌具有较强的氧化能,它可使水果腐败、蔬菜腐烂、酒类和果汁变质。

醋酸杆菌能将酒进一步氧化成醋酸。造酒时如果条件掌握不好,醋酸杆菌就会将美酒变成醋酸。所以,酿酒师傅总是把酒桶盖的严严实实,不让醋酸杆菌混入酒桶。

分离纯化

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材料

样品:取发酵成熟的固体醋醅30g。

培养基:米曲汁乙醇培养基或葡萄碳酸钙培养基。

试剂:1%三氯化溶液,革兰氏染色液,0.1mol/LNaOH标准溶液,1%酚酞指示剂无菌水等。

器皿:平皿,三角瓶,吸管,试管,玻璃珠等。

方法与步骤

富集培养

灭菌后,取500mL三角瓶装入30mL米曲汁液体培养基(其中含有0.0002%结晶紫和3%-5%的乙醇),加入1-2g样品经30℃振荡培养24h,若测定增殖液的pH明显下降、有醋味、镜检细胞革兰氏染色、形态与醋酸菌符合即可分离。

倾注法分离

①取增殖液1mL于装有9mL无菌水三角瓶中(内含玻璃珠数粒),摇匀后,以10倍稀释法依次稀释至10-7,然后分别取10-7、10-6、10-5三个稀释度的稀释液各1mL置于无菌平皿中,每个稀释度平行两个平皿 ;

②熔化米曲汁碳酸钙培养基,稍冷后加入3%的无水乙醇,摇匀,待冷至45℃-50℃,迅速倾入上述各皿,轻轻摇匀,待凝固后置于30℃,保温培养2-3d。观察小菌落的出现,醋酸菌因产生醋酸溶解了培养基中的碳酸钙,而使菌落周围产生透明圈,圈的大小因菌而异。

③挑透明圈不同的菌落于米曲汁碳酸钙乙醇斜面培养基上,30℃培养24-48h。

性能测定

将上述各分离株分别接入米曲汁液体培养基中(300mL三角瓶装有20mL培养基),加无水乙醇至终浓度为5%,30℃振荡培养24h。

①镜检:细胞呈整齐的椭圆或短杆状。

②醋酸的定性分析:取发酵液5mL于洁净的试管中,用10%NaOH液中和,加l%三氯化铁溶液2-3滴,摇匀,加热至沸,如有红褐色沉淀产生而原发酵液已变得五色,即可证明是醋酸。

③生酸的测定:取发酵液1mL于250mL三角瓶中,加中性蒸馏水20mL、酚酞指示剂2滴,用0.1mol氢氧化钠溶液滴定至微红色,计算产酸量。

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