中文名：生物样品

外文名：biologicalsample

分类：植物样品、动物样品等

一般原则

1、代表性

选择一定数量的能符合大多数情况的植株为样品。采集作物或蔬菜时，不要选择田埂边上及离田埂2m范围以内的样品；如采集水生植物，则应注意离开污水排放口适当距离。

2、典型性和适时性

采样的部位要能充分反映所了解的情况，这就是典型性。而适时性是根据研究的目的和环境污染物对植物的影响，必须按照植株的生长状况，发育阶段以及植株的不同部位，如根、茎、叶和果实或具体要求进行分别采样。为了植株同一部分进行比较分析，不能将植株的上、下部位随意混合。

采集方法

1、采样前的准备工作

采样前应预先准备好采集工具，如小铲、枝剪、剪刀、布和塑料袋等，还有标签、记录本、样品采集登记表等物品。

2、样品采集量

样品采集量主要是考虑样品部位处理后的代表性及是否够测定用。为了保证足够的数量，一般要求至少有20~50g干样品，最好有1kg干样。如果是新鲜的样品，以含80%~90%的水分来计算，要比干样量多5~10倍，最好5~10kg。总之应以不少于0.5kg新鲜样品为原则。对水生植物、水果、蔬菜等含水量高的植物，采样量还需酌情增加。

图1

一般在各采样小区内采集一个代表样品，此代表样品是在这块地中分散于5~10处，采取5~10个样品混合组成的。采样点的布置方法以梅花形五点取样，或在小区内平行前进以交互间隔方式取样，如图1所示。

4、样品的保存

将采集好的样品装入布口袋，并附上编写好样品号的标签。采集时必须做好野外调查记录和样品采集登记表。对一些特殊情况也应进行记录，以便查对和分析数据时参考。采集好的样品应尽快送往实验室，运输时要注意通风干燥，以防样品发霉腐烂，最好为冷藏运输。用四分法或八分法选取样品。用新鲜样品进行检测时，应立即送往实验室，充分洗涤、捣碎处理和检测。如当天难以处理，鲜检样品应该暂时冷藏在冰箱内。其余样品可在通风干燥处晾干，去掉灰尘、杂物、脱壳、磨碎，通过1mm筛孔，储存在磨口广口玻璃瓶中备用。

动物的各部分组织均可以分别作为采集对象，但通常是用尿、血液、毛发和指甲等。

1、动物的血液

动物一般多用耳缘静脉取血，先去毛，要去净毛，不伤皮肤，用体积分数为75%的酒精擦动物耳朵，例如兔耳朵，用灯泡照射加热使其血管充血，用大头针刺破静脉放血（先从远心端刺），将血液放入抗凝杯中，边收集边摇匀，以防凝固。

2、动物的尿液

为收集动物的尿液，可将动物放在代谢笼中，使动物的尿液可经下漏斗流入采样瓶中。一般晨尿浓度较高，可一次收集，也可收集2h甚至24h的尿液。

3、 头发和指甲

头发作为样品的主要优点是：采样时受检者无痛、无创伤。样品容易贮存和运送，不需特殊容器；样品不易变质，可长期保存等。

在生物样品的测定中，根据测定项目的不同，首先要经过消解（或灰化），或提取和分离等处理工作，然后才能进行待检组分含量的测定。处理生物样品的方法有消解法 （又称湿法氧化或消化法，主要有硝酸-硫酸消解法、硝酸-高氯酸消解法、硫酸-过氧化氢消解法）、灰化法 （又称燃烧法或高温分解法）、提取法（包括振荡提取、组织捣碎、索氏提取器提取）、分离法和浓缩法。

植物待检样品的制备

1、新鲜样品的制备

测定植物样品中易转化或易降解的即易起变化的物质（如酚、氰、有机农药等）及多汁的瓜果、蔬菜样品，应在新鲜状态下进行测定。制备这些样品时，先将各平均样品用清水、去离子水（或重蒸馏水）洗净（受大气污染的样品还应先用洗涤剂洗），并用干净纱布轻轻擦洗。然后切碎、混合均匀。如蔬菜样品可称取100g放入电动捣碎机的捣碎杯中，加同样质量的蒸馏水或去离子水，含水分多的样品也可以不加水（如熟透的西红柿），含水少的样品可加两倍于样品的水。待检样品按实际质量称量。打碎制成均匀浆状。含纤维较多或较硬的样品，如禾本科植物茎秆、叶子等，不能用捣碎机捣碎，可用不锈钢刀或剪刀切成小碎块或碎片，混合均匀备测定用。

2、烘干样品的制备

用干样进行检测的样品通常要经过如下处理：

（1）清除污物

任何灰尘、泥土、肥料、农药等沾污物均会影响测定结果的准确性，所以必须在烘样前擦刷或用清水、0.1%～0.3%的去污物剂和去离子水等清除样品上的污物，清洗的操作必须迅速，以免溶液和样品长时间接触而引起某些成分如钾、钙的损失。

（2）样品的烘干

经擦净或洗净的样品，如果不用鲜样进行测定，最好尽快在鼓风干燥箱（或在低温真空干燥箱中）烘干，以防发霉变质，并减少化学和生物的变化。烘干时要注意适宜的温度，温度过高时，会引起易挥发元素的损失。

（3）样品的研磨

为使样品的组成更为均匀和易于处理，须将烘干的样品进行研磨粉碎并混合均匀，谷类的果实样品须先脱壳再进行粉碎。

用于测定金属元素的样品，研磨时应注意金属器械对样品的污染问题，如测定样品中的铬等含量时，不能用钢制粉碎机，而用玻璃研钵碾碎，过筛最好用尼龙筛，否则会有锰、镍等元素的污染。总之，在测定样品中的微量元素时，最好是使用玛瑙研钵研碎，以免因再次受到污染引起误差。粉碎磨好的样品储存于聚乙烯瓶或磨口广口玻璃瓶中备用。

动物待检样品的制备

1、血、尿待检样品的制备

（1）全血的制备

环境生物测定中所用的全血是抗凝的全血，即在取出人（或动物）的血液后，必须立即与适量的抗凝剂充分混合，以免血液凝固。为了使血液注入容器后均匀的与抗凝剂接触，必须使抗凝剂能在容器底部铺成薄层，这可在烘干时转动容器来实现。取血量为数毫升时一般用试管储血。用上述方法准备的加有抗凝剂的试管称为抗凝试管。

（2）血浆的制备

环境生物污染测定中所用的血浆也是抗凝血浆。制备方法是将抗凝血在离心机中离心，使血细胞下沉，这样所得的上清液即为血浆。在血浆制备过程中应防止溶血，故要求采取血液时所用的注射器、针头等都需清洁干燥，取得全血后也要避免剧烈震动。

（3）血清的制备

血清是指血液凝固后自行析出的液体。制备血清的方法是采取血液，不加抗凝剂，在室温下使其凝固，通常经3h后血块收缩析出血清，离心分离，吸取上清液即为血清。制备血清也要防止溶血，故所用设备必须干燥，且在血块收缩后及早分出血清。

（4）无蛋白质血液的制备

在环境生物污染测定中有时须避免蛋白质的干扰（常与试剂发生浑浊或沉淀），常用沉淀蛋白质的试剂除去血液中的蛋白质，而保留应测定的化学成分，这种操作称为无蛋白血液的制备。无蛋白血滤液的制备应根据具体检测要求来选择沉淀蛋白质的试剂。

2、动物组织和器官待检样品的制备

离体不久的组织在适宜的温度和pH值条件下，可以进行一定程度的物质代谢。所以在生物测定中，常利用离体组织制成不同的组织样品，用来研究生物化学变化。常用的组织制品有：组织糜、组织匀浆、组织提取液。

（1）组织糜：将新鲜组织用剪刀迅速剪碎，再与砂及适当的缓冲液磨碎或用绞肉机绞成糜状。

（2）组织匀浆：新鲜组织称量后剪碎，加入适当的匀浆制备液，用高速组织捣碎机搅碎组织而制成匀浆。如果组织量较少，可在剪碎组织后用组织匀浆器磨成匀浆。

（3）组织提取液　将组织匀浆经过细纱布过滤的液体或经离心去沉淀后的上清液，即为组织提取液。