植物组织培养编辑

无性繁殖新技术

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植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论，近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术。植物的组织培养广义又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。狭义是指用植物各部分组织，如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

将配好的培养基加入琼脂加热溶解，调至 pH 5.6～5.8，趁热分装于 100 mL组培瓶中，每瓶约 30 mL 。待培养基冷却凝固后，盖上组培盖，或盖上封口膜并用棉线扎牢，然后在高压灭菌锅中 121 ℃（ 1 kg/c㎡）下灭菌 20 min 。取出组培瓶放在台子上，冷却后备用。接种操作所需的一切用具（如长镊子、解剖刀、剪刀等）及灭菌水，需同时灭菌。

商业应用

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在商业领域的运用主要是在各大大型花卉生产基地或铁皮石斛、铁线莲等药材的生产。

异常表现与改进措施

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试管或瓶中培养物的表现、可能原因及改进措施
培养阶段	培养物的表现	症状产生的可能原因	可供选择的改进措施
初代培养阶段启动与脱分化	培养物水浸状、变色、坏死，茎段面附近干枯	表面灭菌剂浓度过高，时间过长；外植体选用部位不当；时期不当	试用较温和灭菌剂，降低浓度，减少时间；试用其他部位，改在生长初、中期采样
	培养物长期培养没有多少反应	生长素种类不当；用量不足；温度不适宜；培养基不适宜	增加生长素用量，试用2,4-D；调整培养温度
	愈伤组织生长过旺，疏松，后期水浸状	生长素及细胞分裂素用量过多；培养温度过高；培养基渗透势低	减少生长素、细胞分裂素用量，适当降低培养温度
	愈伤组织生长过紧密、平滑或突起，粗厚，生长缓慢	细胞分裂素用量过多；糖浓度过高；生长素过量亦可引起	适当减少细胞分裂素和糖的用量
	侧芽不萌发，皮层过于膨大，皮孔长出愈伤组织	采样枝条过嫩；生长素、细胞分裂素用量过多	减少生长素、细胞分裂素用量，采用较老化枝条
继代培养阶段再分化与丛生芽苗增殖	苗分化数量少、速度慢、分枝少，个别苗生长细高	细胞分裂素用量不足；温度偏高；光照不足	增加细胞分裂素用量，适当降低温度
	苗分化较多，生长慢，部分苗畸形，节间极度短缩，苗丛密集，过度微型化	细胞分裂素用量过多；温度不适宜	减少细胞分裂素或停用一段时间，调节适当温度
	分化出苗较少，苗畸形，培养较久苗可能再次愈伤组织化	生长素用量偏高，温度偏高	减少生长素用量，适当降温
	叶粗厚变脆	生长素用量偏高，或兼有细胞分裂素用量偏高	适当减少激素用量，避免叶接触培养基
	再生苗的叶缘、叶面等处偶有不定芽分化出来	细胞分裂素用量过多，抑或该种植物适宜于这种再生方式	适当减少细胞分裂素用量，或分阶段利用这一再生方式
	从生苗过于细弱，不适合生根操作和移栽	细胞分裂素过多，温度过高，光照短，光强不足，久不转接，生长空间窄	减少细胞分裂素用量，延长光照，增加光强，及时转接继代，降低接种密度，改善封口条件
	常有黄叶、死苗夹于丛生苗中，部分苗逐渐衰弱，生长停止，草本植物有时水浸状、烫伤状	瓶内气体状况恶化；pH值变化过大；久不转接糖已耗尽，光合作用不足自身维持；瓶内乙烯含量升高；培养物可能已污染；温度不适	部分措施同上。去除污染，控制温度
	幼苗生长无力，陆续发黄落叶，组织水浸状、煮熟状	部分原因同上。植物激素配比不适，无机盐浓度不适等	部分措施同上。及时继代，适当调节激素配比
	幼苗淡绿，部分失绿	忘加铁盐或量不足；pH值不适，铁、锰、镁元素配比失调，光过强，温度不适	仔细配制培养基，注意配方成分，调好pH值，控制条件
诱导生根阶段	培养物久不生根，基部切口没有适宜的愈伤组织生长	生长素种类不适宜；用量不足；生根部位通气不良；基因型影响，生根程序不适当；pH值不适；无机盐浓度及配合不当	改进培养程序，选用或增加生长素用量，改用滤纸桥液培生根
诱导生根阶段	愈伤组织生长过大过快，根部肿胀或畸形，几条根并联或愈合；苗发黄受抑制或死亡	生长素种类不适；用量过高；或伴有细胞分裂素用量过高；程序不适等	减少生长素或细胞分裂素用量，改进培养程序等