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植物组织培养 编辑
研究历史
配制培养基
（1）愈伤组织诱导培养基： MS 培养基（蔗糖含量为 10 g/L ，2,4 – D 含量为 2 mg/L，琼脂10 g/L）。
（2）试验培养基：在 MS 培养基中加入 IAA 和 6–BA 。
吲哚乙酸（IAA）先用少量 0.1 mol/L NaOH 溶解， 6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量 0.1 mol/L HCl 溶解，然后用蒸馏水稀释，再加入培养基中。
仪器设备
培养室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，三角烧瓶（100mL），烧杯，量筒，组培瓶，组培盖或封口膜，棉线，接种箱或超净工作台，分析天平，长镊子，枪状镊子，剪刀，容量瓶，移液管，牛皮纸。
培养基灭菌
将配好的培养基加入琼脂加热溶解，调至 pH 5.6～5.8，趁热分装于 100 mL组培瓶中，每瓶约 30 mL 。待培养基冷却凝固后，盖上组培盖，或盖上封口膜并用棉线扎牢，然后在高压灭菌锅中 121 ℃（ 1 kg/c㎡）下灭菌 20 min 。取出组培瓶放在台子上，冷却后备用。接种操作所需的一切用具（如长镊子、解剖刀、剪刀等）及灭菌水，需同时灭菌。
在商业领域的运用主要是在各大大型花卉生产基地或铁皮石斛、铁线莲等药材的生产。
培养阶段 | 培养物的表现 | 症状产生的可能原因 | 可供选择的改进措施 |
|---|---|---|---|
初代培养阶段启动与脱分化 | 培养物水浸状、变色、坏死，茎段面附近干枯 | 试用较温和灭菌剂，降低浓度，减少时间；试用其他部位，改在生长初、中期采样 | |
生长素种类不当；用量不足；温度不适宜；培养基不适宜 | 增加生长素用量，试用2,4-D；调整培养温度 | ||
愈伤组织生长过旺，疏松，后期水浸状 | 生长素及细胞分裂素用量过多；培养温度过高；培养基渗透势低 | 减少生长素、细胞分裂素用量，适当降低培养温度 | |
愈伤组织生长过紧密、平滑或突起，粗厚，生长缓慢 | 细胞分裂素用量过多；糖浓度过高；生长素过量亦可引起 | 适当减少细胞分裂素和糖的用量 | |
侧芽不萌发，皮层过于膨大，皮孔长出愈伤组织 | 采样枝条过嫩；生长素、细胞分裂素用量过多 | 减少生长素、细胞分裂素用量，采用较老化枝条 | |
继代培养阶段再分化与丛生芽苗增殖 | 苗分化数量少、速度慢、分枝少，个别苗生长细高 | 细胞分裂素用量不足；温度偏高；光照不足 | 增加细胞分裂素用量，适当降低温度 |
苗分化较多，生长慢，部分苗畸形，节间极度短缩，苗丛密集，过度微型化 | 细胞分裂素用量过多；温度不适宜 | 减少细胞分裂素或停用一段时间，调节适当温度 | |
分化出苗较少，苗畸形，培养较久苗可能再次愈伤组织化 | 生长素用量偏高，温度偏高 | 减少生长素用量，适当降温 | |
叶粗厚变脆 | 生长素用量偏高，或兼有细胞分裂素用量偏高 | 适当减少激素用量，避免叶接触培养基 | |
再生苗的叶缘、叶面等处偶有不定芽分化出来 | 细胞分裂素用量过多，抑或该种植物适宜于这种再生方式 | 适当减少细胞分裂素用量，或分阶段利用这一再生方式 | |
从生苗过于细弱，不适合生根操作和移栽 | 细胞分裂素过多，温度过高，光照短，光强不足，久不转接，生长空间窄 | 减少细胞分裂素用量，延长光照，增加光强，及时转接继代，降低接种密度，改善封口条件 | |
常有黄叶、死苗夹于丛生苗中，部分苗逐渐衰弱，生长停止，草本植物有时水浸状、烫伤状 | 瓶内气体状况恶化；pH值变化过大；久不转接糖已耗尽，光合作用不足自身维持；瓶内乙烯含量升高；培养物可能已污染；温度不适 | 部分措施同上。去除污染，控制温度 | |
部分原因同上。植物激素配比不适，无机盐浓度不适等 | 部分措施同上。及时继代，适当调节激素配比 | ||
幼苗淡绿，部分失绿 | 忘加铁盐或量不足；pH值不适，铁、锰、镁元素配比失调，光过强，温度不适 | 仔细配制培养基，注意配方成分，调好pH值，控制条件 | |
诱导生根阶段 | 培养物久不生根，基部切口没有适宜的愈伤组织生长 | 生长素种类不适宜；用量不足；生根部位通气不良；基因型影响，生根程序不适当；pH值不适；无机盐浓度及配合不当 | 改进培养程序，选用或增加生长素用量，改用滤纸桥液培生根 |
愈伤组织生长过大过快，根部肿胀或畸形，几条根并联或愈合；苗发黄受抑制或死亡 | 生长素种类不适；用量过高；或伴有细胞分裂素用量过高；程序不适等 | 减少生长素或细胞分裂素用量，改进培养程序等 |
