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沙眼衣原体 编辑
基本形态
沙眼衣原体具有两种形态:在细胞外是孢子样具高度传染性的细胞,称为原体;在细胞内是进行复制的细胞,称为始体。始体的体积较大,形状不甚规则,其包膜富有韧性,无刚性的细胞壁,原体和始体内皆含有DNA与RNA 。
培养特性和生化特征
沙眼衣原体是一种有DNA和RNA,能够通过滤器,营严格的细胞内寄生,以二分裂方式繁殖的原核细胞型微生物。沙眼衣原体是一类在细胞内寄生的微生物,大小为250-450nm。衣原体不耐热,在室温下迅速丧失其传染性,加温至50℃,30min即可将其杀死。但是衣原体耐寒,-70℃下能存活数年。四环素、红霉素、氯霉素对它有抑制作用,而链霉素、新霉素对它则无效。常用的消毒剂如0.1%甲醛、0.5%石炭酸可将衣原体迅速灭活 。
沙眼衣原体具有特殊的染色性状,不同的发育阶段其染色有所不同。成熟的原体以Giemsa染色为紫色,与蓝色的宿主细胞浆呈鲜明无比。始体以Giemsa染色呈蓝色。沙眼衣原体对革兰氏染色虽然一般反应为阴性,但变化不恒定。沙眼包涵体在上皮细胞浆内,很致密,如以Giemsa染色,则呈深紫色,由密集的颗粒组成。其基质内含有糖原,以Lugol液染色呈棕褐色斑块 。
毒性
沙眼衣原体感染可导致宿主多种疾病发生,如沙眼、包涵体包膜炎、泌尿生殖道感染和性病淋巴肉芽肿等。妊娠期感染了沙眼衣原体几乎均无症状,但可造成早产、胎膜早破、低体重儿或死胎,并可经产道传染给新生儿而引起新生儿肺炎和包涵体性结膜炎 。
(一)沙眼:由衣原体沙眼生物变种A、B、Ba、C血清型引起。主要经直接或间接接触传播,即眼~眼或眼~手~眼的途经传播。当沙眼衣原体感染眼结膜上皮细胞后,在其中增殖并在胞浆内形成散在型、帽型、桑椹型或填塞型包涵体。该病发病缓慢,早期出现眼睑结膜急性或亚急性炎症,表现流泪、有粘液脓性分泌物、结膜充血等症状与体征。后期移行为慢性,出现结膜瘢痕、眼睑内翻、倒睫、角膜血管翳引起的角膜损害,以致影响视力,最后导致失明。据统计沙眼居致盲病因的首位。1956年我国学者汤飞凡等人用鸡胚卵黄囊接种法,在世界上首次成功地分离出沙眼衣原体,从而促进了有关原体的研究 。
(二)包涵体包膜炎:由沙眼生物变种D~K血清型引起。包括婴儿及成人两种。前者系婴儿经产道感染,引起急性化脓性结膜炎(包涵体脓漏眼),不侵犯角膜,能自愈。成人感染可因两性接触,经手至眼的的途径或者来自污染的游泳池水,引起滤泡性结膜炎又称游泳池结膜炎。病变类似沙眼,但不出现角膜血管翳,亦无结膜瘢痕形成,一般经数周或数月痊愈,无后遗症 。
(三)泌尿生殖道感染:经性接触传播,由沙眼生物变种D~K血清型引起。男性多表现为尿道炎,不经治疗可缓解,但多数转变成慢性,周期性加重,并可合并附睾炎、直肠炎等。女性能引起尿道炎、宫颈炎等,输卵管炎是较严重并发症。该血清型有时也能引起沙眼衣原体性肺炎 。(四)性病淋巴肉芽肿:由沙眼衣原体LGV生物变种引起。LGV要通过两性接触传播,是一种性病。男性侵犯腹股沟淋巴结,引起化脓性淋巴结炎和慢性淋巴肉芽肿。女性可侵犯会阴、肛门、直肠,出现会阴-肛门-直肠组织狭窄 。
沙眼衣原体( chlamydia trachomatis,CT)可以引起多种疾病,如沙眼,还与人类泌尿生殖道疾病相关,如非淋菌性尿道炎、阴道炎、宫颈炎、子宫内膜炎等;CT还可以通过母婴传播新生儿眼结膜炎、肺炎,并可导致胎膜早破、早产、新生儿死亡等。因此,对于CT感染的诊断至关重要,而检验手段主要依靠实验室方法。CT的实验室检测主要有微生物学方法、免疫学方法、分子生物学检测方法 。
微生物学诊断
多数衣原体引起的疾病可根据临床症状和体征确诊。但对早期或经症患者,须行实验室检查来帮助诊断。
直接涂片镜检
沙眼急性期患者取结膜刮片,Giemsa或碘液及荧光抗体染色镜检,查上皮细胞浆内有无包涵体。包涵体结膜炎及性病淋巴肉芽肿,也可从病损局部取材涂片,染色镜检,观察有无衣原体或包涵体。
分离培养
用感染组织的渗出液或刮取物,接种鸡胚卵黄囊或传代细胞,分离衣原体,再用免疫学方法鉴定。
血清学试验
主要用于性病淋巴肉芽肿的辅助诊断。常用补体结合试验,若双份血清抗体效价升高4倍或以上者,有辅助诊断价值。也可用ELISA、凝集试验。
PCR试验
设计不同的特异性引物,应用多聚酶链式反应可特异性诊断沙眼衣原体,具有敏感性高,特异性强的特点,现被广泛应用。
快速检测
沙眼衣原体快速检测分定性和定量快速检测。流行常用的为金标定性快速检测(胶体金法)。其检测原理为:用抗衣原体脂多糖单克隆抗体和羊抗鼠IgG多克隆抗体分别固定于固相硝酸纤维素膜,并和胶体金标记的另一抗衣原体脂多糖单克隆抗体及其他试剂和原料制成,应用胶体金免疫层析技术,采用双抗体夹心的形式建立的衣原体检测方法,用于女性宫颈和男性尿道中衣原体的检测。从而达到检测女性宫颈和男性尿道中衣原体的存在,临床辅助诊断衣原体感染,试验结果还需要临床医生结合患者症状、体征及其他检查结果进一步确定的目的 。
金标法定性沙眼衣原体快速检测有着快速、方便、准确性高的优点。为临床医生的辅助诊断等节省了很多时间 。