TAE缓冲液 编辑

化学溶液
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TAE缓冲液(TAE Buffer)是由三羟甲基氨基甲烷(Tris base)、乙酸(acetic acid)和乙二胺四乙酸(EDTA)组成的缓冲液,英文名为三种组成成分的首字母。在分子生物学实验中常被用作DNA或RNA进行凝胶电泳时的缓冲液。是使溶液具有一定的导电性,以利于DNA分子的迁移,例如,一般电泳缓冲液中应含有0.01-0.04 mol/L的Na+离子,Na+离子的浓度太低时电泳速度变慢;太高时就会造成过大的电流使胶发热甚至熔化。电泳缓冲液还有一个组分是EDTA,加入浓度为1-2 mmol/L,目的是螯合Mg2+ 离子,防止电泳时激活 DNA,此外还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀

基本信息

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中文名:TAE缓冲液

外文名:TAE Buffer

作用:维持合适的pH

氧化反应:(4OH--4e-=2H2O+O2)

还原反应:(4H++4e-=2H2)

产品介绍

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TAE是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质),且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种(TBE和TPE)缓冲液快约10%,电泳大于13 kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果,此外,回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。TAE的缺点是缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。

TAE的配方

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50×TAE Buffer 配制方法:

1.

称量Tris 242 g,Na2EDTA·2H2O 37.2 g于1 L烧杯中;2.

向烧杯中加入约600 ml去离子,充分搅拌溶解;3.

加入57.1 ml的冰乙酸,充分搅拌;4.

加去离子水定容至1 L后,室温保存。

使用时稀释50倍或100倍 即1×TAE Buffer 或 0.5×TAE

TBE与TPE

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TBE的特点是缓冲能强,长时间电泳时可选用TBE,并且当用于电泳小于1kb的片段时分离效果更好。TBE用于琼脂凝胶时易造成高电渗作用,并且因与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基酸盐复合物而使DNA片段的回收率降低,所以不宜在回收电泳中使用。

TPE的缓冲能力也较强,但由于磷酸盐易在乙醇沉淀过程中析出,所以也不宜在回收DNA片段的电泳中使用。

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