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培养物 编辑
培养物(culture)是指一定时间一定空间内微生物的细胞群或生长物。如微生物的斜面培养物、摇瓶培养物等。在人为规定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体。如果某一培养物是由单一微生物细胞繁殖产生的,就称之为该细菌的纯培养物(pure culture)。
细菌连续培养方式
分批培养(Batch Culture)分批培养是指在一个密闭系统内投入有限数量的营养物质后,接入少量微生物菌种进行培养,使微生物生长繁殖,在特定条件下完成一个生长周期的微生物培养方法。补料分批培养(Fed-batch Culture)分批补料式培养是指先将一定量的培养液装入反应器,在适宜的条件下接种细胞,进行培养,使细胞不断生长,产物不断形成,而在此过程中随着营养物质的不断消耗,不断地向系统中补充新的营养成分,使细胞进一步生长代谢,直到整个培养结束后取出产物。
分批补料式培养的特点就是能够调节培养环境中营养物质的浓度:一方面,它可以避免在某种营养成分的初始浓度过 高时影响细胞的生长代谢以及产物的形成;另一方面,它还能防止某些限制性营养成分在培养过程中被耗尽而影响细胞的生长和产物的形成。同时在分批补料式培养 过程中,由于新鲜培养液的加入,整个过程的反应体积是变化的。
根据分批补料控制方式不同,有两种分批补料式培养方式:无反馈控制流加和有反馈控制流加。
无反馈控制流加包括定流量流加和间断流加等;有反馈控制流加一般 是连续或间断地测定系统中限制性营养物质的浓度,并以此为控制指标来调节流加速率或流加液中营养物质的浓度等。分批补料式培养的反应体积不断变化。
连续培养
连续培养又叫开放培养,是相对分批培养或密闭培养而言的。连续培养是采用有效的措施让微生物在某特定的环境中保持旺盛生长状态的培养方法。具体地说,当微生物以单批培养的方式培养到指数期的后期时,一方面以一定速度连续流入新鲜培养基和通入无菌空气,并立即搅拌均匀;另一方面,利用溢流的方式,以同样的流速不断流出培养物。于是容器内的培养物就可达到动态平衡,其中的微生物可长期在指数期的平衡生长状态和衡定的生长速率上,于是形成了连续生长。
微生物在一定条件下,如果不断补充营养物质和排除有害的代谢产物,理论上,微生物都可保持恒定的对数生长。通常采用两种方式:
(1)恒浊培养,当微生物在恒浊器中培养进入对数期时,不断从外界加入新鲜培养基,而同时又流出培养物,用光电池信号控制浊度,以维持恒定的细胞密度。
(2)恒化培养,微生物在恒化器中培养,通过控制恒化器中微生物生长所必需营养物的浓度,以保证微生物持续生长。连续培养应用于工业发酵中称连续发酵,并已实际应用,例如,连续发酵法生产酒精,半连续发酵法生产丙酮、丁醇等。
1、保种、分离菌种,当然,分离也可划平板,(斜面中的培养基就是固体培养基)。
2、固体培养基与液体培养基的区别在于固体培养基加了2%的琼脂。固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。液体培养基的成分均匀,微生物能充分接触和利用培养基中的养料,适于作生理等研究一般实验室都用固体或半固体培养基,便于观察菌落形态和显色等现象,大规模工业生产则是用液体培养基,便于发酵条件的控制。
3、震荡培养就是摇床培养,一般用于好氧菌的试验,有利于菌体对营养的利用,震荡过程也是一个搅拌与溶氧的过程,有利于菌体的健壮生长。