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过碘酸希夫反应 编辑
过碘酸希夫反应，简称为 PAS反应（periodic acid Schiff reaCTion）。其化学反应的基本过程多糖分子一般含有羟基，通过过碘酸的氧化作用，使多糖暴露出醛基，醛基与无色碱性品红结合反应，于多糖存在的部位形成新的紫红色复合物，通过显微镜观察而对组织细胞内的糖原、糖蛋白或粘多糖等化学成分进行定位、定性和定量的研究。
中文名：过碘酸希夫反应
外文名：periodic acid Schiff reaction
作 用：检测组织中的糖类
简称：PAS反应
PAS染色又称糖原染色。一般用来显示糖原和其它多糖物质。
原理：过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成乙二醛，再与Schiff氏液的无色品红结合，红色，定位于胞浆上。
随着医学实验技术的发展，糖原染色应用的范围更加广泛，如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质 ，心肌病变及其他心血管疾病的诊断 ，糖原累积病诊断和研究 ，糖尿病的诊断和研究 ，用于某些肿瘤的诊断等。除用于糖原的鉴定和黏液的显示外 ，还可以观察肾小球基底膜 、结肠杯状细胞 中性黏液物质 、阿米巴滋养体和霉菌的着色。临床诊断、分类和治疗提供 了重要的依据。
固定液
CarNOy固定液： 纯酒精60 ml 冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以选用75%酒精.
液配制
1.过碘酸酒清夜配法:
过碘酸(HIO .2H O) 0.4g 95%酒精35ml M/5醋酸钠(2.72g+蒸馏水100ml) 5ml蒸馏水10ml
保存于冰箱内,用棕色瓶,可用两周.
2.Schiff氏液:
0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中,时时摇动三角瓶5分钟,使之充分溶解.冷却至50℃后过滤加入10毫升1N盐酸.冷却至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸钠,在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存.
3.Schiff氏酒精液配置 Schiff氏液 11.5ml 1N HCI 0.5ml 纯酒精 23ml
4. 亚硫酸水 1%偏重亚硫酸钠10ml 1N HCI 10ml 蒸馏水 180ml的树胶溶解。
5.哈瑞或迈耶苏木精 略
染色步骤
2. 蒸馏水洗
3. 过碘酸酒清夜10min
4. 自来水冲洗10min
5.Schiff氏液10min
6. 流水冲洗5min
7.用哈瑞苏木精或迈耶苏木精染核3min（细胞核染色过深可用盐酸酒精分化）
8. 流水冲洗5min
9. 常规脱水、透明、封固
结果
PAS阳性为红色，细胞核蓝色。
准备
1、10g/L过碘酸液
2、Schiff染液：
碱性品红0.5g
DH2O 100ml
煮沸后，待片刻，加入碱性品红，振荡数分钟使品红溶解，冷至50℃加入1M的盐酸20ml，混匀。待冷
却至25℃加入偏重亚硫酸钠0.5g，混合，置于带塞的棕色瓶中，放于暗处24小时，染液为无色，如为微红则
加活性炭1－2g，混合过滤，如过滤液仍有红色，应再加少许活性炭，时红色完全被吸收为止。制成后置于棕色
瓶内保存在冰箱备用，如变为红色，则不能使用。
4、苏木素液：
苏木素0.9g
95%乙醇 10ml
铵（钾）明矾 20g
DH2O 200ml
将苏木素溶于95%的乙醇，钾明矾溶于水（可加热），然后将苏木素液加入明矾液中混合，用强火煮
沸后加氧化汞0.5g，迅速搅拌，成深紫色，迅速移入冷水中，次日过滤，临用时取此液95ml加冰醋酸
5ml，可使细胞着色清楚。
流程
1、将新鲜血片或骨髓片用95%乙醇固定10分钟。
2、10g/L过碘酸液作用20分钟
3、DH2O洗涤几次，晾干
4、Schiff染液，60分钟
5、用自来水洗涤15分钟（细水长流冲洗）
6、苏木素染液10分钟。
7、自来水冲洗15分钟，待干。
结果
阳性反应，胞浆呈红色，阴性反应，胞浆呈无色；
在正常血片中RBC不染色；
PLT染成深红色；
中性粒细胞胞浆染成红色或深红色，有些细胞有阳性颗粒；
单核细胞的胞浆染成淡红色，可含有细小或粗大阳性颗粒；
少数淋巴细胞的胞浆内含有少许小的淡红色或红色颗粒；
正常骨髓的幼稚细胞和有核RBC都不染色；
巨核细胞的胞浆内呈弥散红色或深红色。
巨核细胞的胞浆内呈弥散红色或深红色。
