间接免疫荧光试验编辑

间接免疫荧光试验

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间接免疫荧光试验是用特异性抗体与标本中相应抗原反应后，再用荧光素标记的第二抗体（抗抗体）与抗原-抗体复合物中第一抗体结合，洗涤后在荧光显微镜下观察特异性荧光，以检测未知抗原或抗体。本法比直接法敏感度提高5-10倍，且一种荧光二抗可检测多种抗原抗体系统，缺点是易产生非特异性荧光。

检查前：　抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物，避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天的晚八时以后，应禁食，以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。　检查时：　应放松心情，避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难　不适宜人群：没有

检查过程

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（1）滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，10min后弃去，使标本保持一定湿度。　（2）滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间(参考：30min)。　（3）取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸3-5 min，不时振荡。　（4）取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。　（5）立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度，一般可用“+”表示：　(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱，但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上，而各种对照显示为(±)或(-)，即可判定为阳性。