免疫荧光检查编辑

一种检查特异蛋白抗原在组织或细胞内分布的方法

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免疫荧光检查（immuNOfluorescence examination）是将荧光素与抗体连接成荧光抗体，再与待检标本中的抗原反应，将反应物置荧光显微镜下观察抗原抗体复合物散发的荧光，借此对标本中的抗原进行鉴定和定位。中文名免疫荧光检查外文名immunofluorescence examination临床意义对标本中的抗原进行鉴定和定位图集科普中国

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余仁欢丨主任医师

中国中医科学院西苑医院肾内科审核

目录1原理2检查方法3临床意义基本信息

（5）立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度来判断免疫复合物的多少，常用半定量法，（-）阴性，无荧光；（±）高倍镜下似乎可见；（+）低倍镜下似乎可见，高倍镜下明显可见；（++）低倍镜下明显可见，高倍镜下清晰可见；（+++）低倍镜下清晰可见，高倍镜下耀眼；（++++）低倍镜下耀眼，高倍镜下刺眼。

2. 间接法

如检查未知抗原，先用已知未标记的特异抗体（第一抗体）与抗原标本进行反应，用水洗去未反应的抗体，再用标记的抗抗体（第二抗体）与抗原标本反应，使之形成抗原—抗体—抗体复合物，再用水洗去未反应的标记抗体，干燥、封片后镜检。如果检查未知抗体，则表明抗原标本是已知的，待检血清为第一抗体，其它步骤的抗原检查相同。

（1）滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于已知抗原标本片，10分钟后弃去，使标本片保持一定湿度。

（2）滴加以0.01mol/L，pH7.4的PBS适当稀释的待检抗体标本，覆盖已知抗原标本片。将玻片置于有盖搪瓷盒内，37℃保温30分钟。

（3）取出玻片，置于玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗1～2次，然后按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸5分钟，不时振荡。

（4）取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，滴加一滴一定稀释度的荧光标记的抗人球蛋白抗体。

（5）将玻片平放在有盖搪瓷盒内，37℃保温30分钟。

（6）重复操作步骤（3）。

（7）取出玻片，用滤纸吸去多余水分，滴加一滴缓冲甘油，再覆以盖玻片。

（8）荧光显微镜高倍视野下观察，结果判定同直接法。